Методика полимеразной цепной реакции (ПЦР) считается одним из наиболее эффективных способов лабораторного распознавания инфекционных болезней. Она основана на обнаружении ДНК-сегментов возбудителя в тестируемом материале. Технологически все ПЦР-анализы состоят из таких этапов: выделения ДНК (РНК) из пробы, копирования (амплификация) необходимого количества специфичных ДНК-компонентов, визуальной детекции выделенных фрагментов. Так в отобранном биоматериале удается идентифицировать специфические ДНК-фрагменты искомого возбудителя.
Если в аналитическом образце, полученном от пациента, отсутствует искомая ДНК-мишень, продукт амплификации не образуется и визуальная детекция не наблюдается.
Для этого исследования проводится анализ крови на ПЦР, отбирается спинномозговая жидкость, моча, мазок ПЦР со слизистых оболочек, мокрота, слюна, биопсийный материал. ПЦР-диагностика осуществляется на специальном оборудовании с применением программируемых термостатов (амплификаторов). Детекция результатов выполняется электрофоретическим методом в полиакриламидном или агарозном геле, а также гибридизационно-ферментным и гибридазицонно-флуоресцентным.
Изучение результатов тестирования осуществляется путем качественного и количественного учета. Качественная интерпретация подтверждает наличие или отсутствие в отобранном у пациента материале специфического, свойственного для конкретного возбудителя ДНК-сегмента. Количественный учет задействуют для наблюдения за динамикой вирусных инфекций и результативностью лечебных мероприятий. Так делается анализ ПЦР на ВИЧ, а также ПЦР диагностика гепатита В и ПЦР диагностика гепатита С.
К несомненным преимуществам ПЦР-исследований относятся высокая специфичность и чувствительность. Это позволяет избежать регистрации ложных результатов и обнаружить в тестируемом биоматериале даже единичные клеточные экземпляры бактерий и вирусов.
В каких случаях назначают инфекционную диагностику методом ПЦР
ПЦР диагностика инфекционных заболеваний назначается врачами разного профиля — инфекционистом, дерматовенерологом, гинекологом, гастроэнтерологом, пульмонологом, ЛОР-врачом и др. В каждом конкретном случае ПЦР-исследование преследует разные цели:
- установить наличие или отсутствие конкретного патогена-возбудителя;
- подтвердить необходимость назначения терапевтических мероприятий;
- оценить качество терапии.
Особенно востребованы ПЦР-анализы при диагностировании микроорганизмов, которых затруднительно культивировать в условиях лаборатории и атипичных бактерий. К этой группе патогенных микроорганизмов также относятся внутриклеточные паразиты, длительное время присутствующие в организме человека.
Важную диагностическую информацию обеспечивает анализ ПЦР при беременности. Он позволяет идентифицировать целый ряд болезней, потенциально опасных для плода: токсоплазмоза, вируса краснухи, ВИЧ, сифилиса, хламидиоза, микоплазмоза и др. При осуществлении ПЦР-тестов возможно использовать архивный биоматериал, биологические остатки, а также материал, полученный из объектов внешней среды (почвы, воды и т.д.).
Какие заболевания и патологии выявляет инфекционная диагностика методом ПЦР
В большинстве современных клиник для идентификации патогенных возбудителей применяется ПЦР-диагностика. Киев располагает новейшими диагностическими центрами, в которых накоплен значительный опыт проведения ПЦР. Стоимость этих тестов отличается в зависимости от используемой техники исследования, видовой принадлежности возбудителя, ценовой политики выбранного медцентра.
Сегодня каждый пациент может сдать анализы ПЦР для распознавания таких инфекционных патологий:
- туберкулеза;
- ВИЧ-инфекции;
- вирусных гепатитов;
- сальмонеллеза, дифтерии, бруцеллеза, коклюша, туляремии;
- сифилиса, гонореи и трихомониаза;
- уреаплазмоза;
- хламидийной инфекции и микоплазмоза;
- папилломавирусной и герпесвирусной инфекции;
- хеликобактериоза;
- цитомегаловирусной инфекции;
- клещевого энцефалита и др.
Для точной постановки диагноза анализ на ПЦР сопоставляется с результатами клинического осмотра, другими лабораторными и инструментальными исследованиями.
Читать подробнее »
