Діагностика заражень нетиповими мікроорганізмами (Диагностика заражений нетипичными микроорганизмами)

• Забір та вид матеріалу.
• Інтерпретація результатів серологічних досліджень.

До нетипових мікроорганізмів відносятьсяMycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, Chlamydia trachomatis и Legionella pneumophila.

Забір та вид матеріалу.

1. Час забору: у разі серологічної діагностики досліджуйте 2 зразки сироватки – на початку захворювання (1 міс. від появи симптомів) та через 2-4 тижні, з метою підтвердження утворення антитіл класу IgM або підвищення титру специфічних антитіл класу IgG. У разі серологічної діагностики інфікування Legionella або C. pneumoniae показаним є дослідження 3-го зразка, взятого ще через 4 тижні. (6-8 тижнів від появи симптомів).

2. Вид та спосіб забору матеріалу.

• Мікроорганізм: L.pneumophila а.
• Матеріал: мокротиння, бронхіальні та бронхо-альвеолярні змиви, плевральний випіт, біоптат тканини, сироватка, сеча.
• Метод виявлення: посів, антитіла в сироватці, антиген L. pneumophila в сечі, пряма імунофлюорисценція, PCRb.
• Мікроорганізм: C. pneumoniae.
• Матеріал: мазок з носоглотки, бронхіальні та бронхо-альвеолярні змиви, сироватка.
• Метод виявлення: виявлення антигену методом імунофлюацен культурі клітин.
• Мікроорганізм: C. trachomatis.
• Матеріал: виділення з каналу шийки матки, мазок (виділення) з уретри, сеча, секрет з піхви, сироватка.
• Метод виявлення: як вище
• Мікроорганізм: М. pneumoniae.
• Материал: мазок із носоглотки, мокротиння, бронхіальні та бронхо-альвеолярні змиви, сироватка, антитіла в плазмі, PCR.

3. Зберігання та транспортування матеріалу.

1. Матеріал для імунофлюорисцентного дослідження, яке виявляє антиген C. pneumoniae або C. trachomatis - нанесіть препарат не скло, зафіксуйте алкоголем, висушіть і перешліть у лабораторію;
2. Сироватка для серологічного дослідження - можна зберігати в температурі 4°C протягом 3 днів, а при -70°C протягом декількох років;
3. Кров для серологічних досліджень - якнайшвидше доставте в лабораторію (не можна заморожувати, але можна залишити протягом ≤48 год при температурі 2-8°C);
4. Мокроти і змиви з бронхіального дерева можназберігати при температурі 2-8 ° C протягом 24 годин, краще - заморозити при температурі -70°C;
5. Сеча - можна зберігати протягом ≤24 годин при температурі 2-8°C або протягом року при температурі -70°C.

Діагностичні центри Харкова, де можна пройти ендоскопію та клініки Киева по направленню ендоскопії на сайті likarni.com.

Надсилаючи на дослідження матеріал для виявлення нетипових мікроорганізмів, зверніть увагу на всі загальні рекомендації щодо діагностики бактеріальних інфекцій. Матеріал надсилайте за темпу. 4°C (зразки дослідження на предмет М. pneumoniae при темп. 37°C). Матеріали (за винятком цільної крові) для проведення досліджень щодо L. pneumophila можна надсилати замороженими.

Інтерпретація результатів серологічних досліджень.

1. C. pneumoniae або C. trachomatis: перше інфікування - IgM через 3 тижні, IgG через 6-8 тижнів; повторне інфікування – IgM (низький титр), IgG через 1-2 тижні. (швидке наростання титру); хронічна інфекція - принаймні у 2 рази підвищений титр IgA. Позитивним результатом при гострій інфекції вважається сероконверсія, тобто, діагностично значуще, 4-х кратне підвищення титру специфічних антитіл або наявність антитіл класу IgM. В даний час стандартним методом ідентифікації C. pneumoniae та C. trachomatis є виявлення антигенів бактерії в досліджуваному клінічному матеріалі імунофлюорисцентним (або імуноферментним) методом з використанням моноклональних антитіл.

2. М. pneumoniae: у дітей та дорослих у віці <20 років протягом першого періоду захворювання (7-21 днів) наявні специфічні антитіла класу IgM; у літніх осіб швидше (7-9 днів) зростає титр специфічних антитіл IgG. За позитивний результат приймається сіркоконверсія або титр ≥1:32.

3. Бактерії роду Legionella: позитивні результатом вважається сероконверсія (підвищення титру антитіл, коли титр становить ≥1:128) між гострим періодом та періодом реконвалесценції. Єдиний результат менш достовірний. Найчастіше специфічні антитіла класу IgM з'являються після 15-20 днів від інфікування, а антитіла класу IgG – навіть після 6-9 тиж. Можливе виникнення перехресних реакцій, зокрема, B. pertussis. Значення серологічних методів зменшується після впровадження швидких тестів виявлення антигенів L. pneumophila 1 серотипу у сечі. Антигени L. pneumophila виділяються з сечею на початку захворювання (до 7-10 днів). Швидкі тести характеризуються чутливістю 80% та специфічністю 99-100%, тому вважається, що легіонельоз (викликаний 1 серотипом) можна не підтверджувати, якщо результат обстеження в ≥3 зразках сечі, взятих у різні дні, є негативним. Ці тести виявляють лише антигени 1 серотипу L. pneumophila (більшість позашпитальних заражень).

Переклад російською мовою:

• Забор и вид материала.
• Интерпретация результатов серологических исследований.

К нетипичными микроорганизмам относятся Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, Chlamydia trachomatis и Legionella pneumophila.

Забор и вид материала.

1. Время забора: в случае серологической диагностики исследуйте 2 образца сыворотки - в начале заболевания (1 мес. от появления симптомов) и через 2-4 нед. с целью подтверждения образования антител класса IgM или повышения титра специфических антител класса IgG. В случае серологической диагностики инфицирования Legionella или C. pneumoniae показанным является исследование 3-го образца, взятого через еще 4 нед. (6-8 нед. от появления симптомов).

2. Вид и способ забора материала.

• Микроорганизм: L.pneumophila а.
• Материал: мокроты, бронхиальные и бронхо-альвеолярные смывы, плевральный выпот, биоптат ткани, сыворотка, моча.
• Метод выявления: посев, антитела в сыворотке, антиген L. pneumophila в моче, прямая иммунофлюорисценция, PCRb.
• Микроорганизм: C. pneumoniae.
• Материал: мазок из носоглотки, бронхиальные и бронхо-альвеолярные смывы, сыворотка.
• Метод выявления: выявление антигена методом иммунофлюорисценции, антитела в сыворотке, PCRb, культивация в культуре клеток.
• Микроорганизм: C. trachomatis.
• Материал: выделения из канала шейки матки, мазок (выделения) из уретры, моча, секрет из влагалища, сыворотатка.
• Метод выявления: как выше
• Микроорганизм: М. pneumoniae.
• Материал: мазок из носоглотки, мокрота, бронхиальные и бронхо-альвеолярные смывы, сироватка, антитела в плазме, PCR.

3. Хранение и транспортировка материала.

1. Материал для иммунофлюорисцентного исследования, которое обнаруживает антиген C. pneumoniae или C. trachomatis - нанесите препарат на стекло, зафиксируйте алкоголем, высушите и перешлите в лабораторию;
2. Сыворотка для серологического исследования - можно хранить в плотно закрытом резервуаре при температуре 4°C в течение 3 дней, а при -70°C в течение нескольких лет;
3. Кровь для серологических исследований - как можно быстрее доставьте в лабораторию (нельзя замораживать, но можно оставить в течение ≤48 ч при температуре 2-8°C);
4. Мокроты и смывы из бронхиального дерева - можно хранить при температуре 2-8 ° C в течение 24 ч, лучше - заморозить при температуре -70 ° C;
5. Моча - можно хранить в течение ≤24 ч при температуре 2-8°C или в течение года при температуре -70°C.

Диагностические центры Харькова, где можно пройти эндоскопию и клиники Киева по направлениям эндоскопии на сайте likarni.com.

Отправляя на исследование материал для выявления нетипичных микроорганизмов, обратите внимание на все общие рекомендации, касающиеся диагностики бактериальных инфекций. Материал присылайте при темп. 4°C (образцы для исследования на предмет М. pneumoniae при темп. 37°C). Материалы (за исключением цельной крови) для проведения исследований на предмет L. pneumophila можно присылать замороженными.

Интерпретация результатов серологических исследований.

1. C. pneumoniae или C. trachomatis: первое инфицирование - IgM через 3 нед., IgG через 6-8 нед.; повторное инфицирование - IgM (низкий титр), IgG через 1-2 нед. (быстрое нарастание титра); хроническая инфекция - по крайней мере, в 2 раза повышен титр IgA. Положительным результатом при острой инфекции считается сероконверсия, то есть, диагностически значимое, зачастую, 4 кратное повышение титра специфических антител или наличие антител класса IgM. В настоящее время стандартным методом идентификации C. pneumoniae и C. trachomatis является выявление антигенов бактерии в исследуемом клиническом материале иммунофлюорисцентним (или иммуноферментным) методом с использованием моноклональных антител.

2. М. pneumoniae: у детей и взрослых в возрасте <20 лет в течение первого периода заболевания (7-21 дней) имеющиеся специфические антитела класса IgM; у пожилых лиц быстрее (7-9 дней) возрастает титр специфических антител IgG. За положительный результат принимается сероконверсия или титр ≥1:32.

3. Бактерии рода Legionella: положительным результатом считается сероконверсия (повышение титра антител, когда титр составляет ≥1:128) между острым периодом и периодом реконвалесценции. Единственный результат менее достоверный. Чаще специфические антитела класса IgM появляются после 15-20 дней от инфицирования, а антитела класса IgG - даже после 6-9 нед. Возможно возникновение перекрестных реакций, в частности с B. pertussis. Значение серологических методов уменьшается после внедрения быстрых тестов для выявления антигенов L. pneumophila 1 серотипа в моче. Антигены L. pneumophila выделяются с мочой в начале заболевания (до 7-10 дня). Быстрые тесты характеризуются чувствительностью 80% и специфичностью 99-100%, поэтому считается, что легионеллез (вызванный 1 серотипом) можно отрицать, если результат обследования в ≥3 образцах мочи, взятых в разные дни, является отрицательным. Эти тесты выявляют только антигены 1 серотипа L. pneumophila (большинство внегоспитальных заражений).